胰腺靶向AAV(干扰/过表达/敲除)

   胰腺是机体重要的内分泌功能器官,参与机体消化、血糖代谢,脂质代谢等。当其发生病变会导致糖尿病、胰腺癌的发生,因此在代谢和肿瘤研究中找到靶向胰腺的病毒载体非常重要。
 

不同血清型AAV的胰腺感染嗜性

目前常使用AAV8感染胰腺。
图1. AAV8、AAV9在胰腺中转导对比[1]
 

启动子选择

常见启动子:CAG[2]
 
AAV在胰腺中注射方式
目前AAV感染胰腺的方式目前有两种,一种是通过胆管将病毒注射入胰腺,另一种是腹腔注射感染胰腺。其中通过胆管感染需要用微夹钳夹住胆胰管的近肝端和近十二指肠端,然后用泵将病毒注入胆管感染胰腺;而腹腔注射的方法更为便捷,但组织特异性较弱。
 
注射剂量[1]
注:此表仅作参考,不同注射方式剂量会有所不同,请以预实验结果为准。
 

实例展示

  • AAV介导的Igf1胰腺过表达抑制了小鼠自身免疫性糖尿病的进展
  • 载体:AAV8-CAG-GFP;
  • 实验动物:NOD小鼠
  • 注射方式和剂量:通过胰腺导管注射的方式进行感染。注射滴度1.0x1012 vg/ml。
  • 启动子:CAG;
  • 实验方法和结果:通过AAV介导的基因转移Igf1的局部表达抵消了小鼠向糖尿病的进展,注射后2周取材切片免疫荧光观察。
 
 
图3. 内分泌和外分泌胰腺病毒的感染分布[2]
 
参考文献:
[1]Kayla A.Quirin. olecular Therapy: Methods & Clinical Developmen, 2018
[2]Mallol. Molecular Metabolism,2017

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