森林脑炎病毒(SFV)

简介

       森林脑炎病毒(Semliki Forest virus(SFV))属于囊膜的正链 RNA 病毒,基因组大小为 12 kb。这种病毒被改造成复制缺陷型病毒SF146,并能够产生较高的病毒滴度。与逆转录病毒不同的是该缺陷型的病毒粒子中依然含有多个病毒基因,感染神经元后病毒基因组大量的复制,伴随外源基因的快速表达的同时产生严重的细胞毒性。
       因此SF146适合短期的快速标记,不适合基因的长时间过表达,这限制了其神经环路功能研究中的应用,目前多用于环路的标记成像。例如表达荧光蛋白的森林脑炎病毒被用于环路的快速稀疏标记,结合荧光显微光学切片断层成像系统(fMOST)进行神经元精细结构成像。

应用

1)SF146可实现对神经元快速精细的标记,描绘神经元的精细形态,实时观测神经元动态变化(树突棘、突触);(参见案例展示一)
2)利用SF146快速表达的特性,可表征动物对特定事件(神经迁移、疾病、学习、记忆)的编码(突触、神经网络连接)。

案例展示

实例一:ACC脑区锥体神经元稀疏标记和形态特征分析(图1,PMID: 31332372)

实验动物:Shank3 KO小鼠,WT小鼠
使用的病毒:SFV-EGFP
实验方法和结果:分别在Shank3 KO小鼠和WT小鼠ACC脑区注射500 nl SFV-EGFP(滴度:2.1×106 PFU/ ml)12 h后取材切片观察,发现Shank3 KO小鼠锥体细胞的树突状复杂性、总棘和蘑菇状棘密度明显低于WT小鼠。

图1. Shank3 KO小鼠ACC的形态学改变

 

相关链接:稀疏标记、神经结构环路研究

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